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组培知识

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紫色马铃薯的组培技术研究

1.植物简介
紫色马铃薯(Slianum tuberoosum. L.cv)是茄科1年生作物,原产于南美洲。
2.培养基
(1)诱导培养基:MS+NAA 0.3mg/L;
(2)继代培养基:MS+B9(70ml/L);
(3)生根培养基:1/2MS+NAA 0.5mg/L+B9(70ml/L)
(4)微型薯诱导培养基:MS+NAA 0.5mg/L+IBA 0.5mg/L。
培养基(1)(2)(4)中均添加3%的蔗糖、0.65%的琼脂,培养基(3)中添加2%的蔗糖、0.65%琼脂,pH均为5.8 。
3.外植体
紫色马铃薯以收获的种薯储藏后冬季在温室中催芽,待其新梢长至5-6cm时,剪取茎尖和带腋芽的茎段作为外植体。
4.外植体消毒
取茎尖和带腋芽的茎段(1-1.5cm)剪去叶片,用流水冲洗2-3小时,在超净工作台上用75%酒精灭菌10s,用无菌说冲洗3次,再用0.1%升汞浸泡6min,用无菌水冲洗4次,然后将外植体接种至诱导培养基上。
5.分化及生长
顶芽或腋芽接种10天后,芽开始萌动,4周后长成2-3cm高的芽苗,叶片绿色,生长正常,将获得的无菌苗剪成1-1.5cm长的茎段接种到继代培养基上。2周后茎段长至4-6cm,腋芽萌动且出现分枝,叶片浓绿,生长健壮。
当幼苗长至1-2cm高时,即可将其接种到生根培养基上,培育温度为(25±1)℃,每天光照12h,光照强度为1500-2500lx。
6.炼苗移栽
当苗子长至2.5-3.0cm高时,并且有5条1-2cm长的新根时,即可进行移栽。先把组培苗放在室内开瓶炼苗1-2天,然后洗去根部培养基,移栽到蛭石中,保持空气湿度80%左右,温度15-25℃。
7.微型薯诱导
将组培生根健壮的芽苗转接到微型薯诱导培养基上,10天左右,组培苗基部陆续长出白色细根,15天后,茎段腋芽处开始露出气生根,待长至1.5-2.0cm时,在腋芽处长出表皮为深紫色的微型薯,4周后,微型薯长至0.5-1.0cm时,即可采收。
8.意义
紫色马铃薯是一种无性繁殖作物。在栽培过程中容易受到病毒侵染而导致品种退化,通过茎尖组织培养无菌马铃薯植株能够长期保存优良品种的生产潜力,并建立一系列的组培快繁体系,为生产提供了优良种薯,从而为提取抗氧化剂提供了新的途径。